Efecto de Tropaeolum Tuberosum o "Mashua" (tropaeolaceae) sobre la expresión génica relacionada a espermatogénesis en ratón

Introducción: Tropaeolum tuberosum, conocido comomashua, es un tubérculo andino que tiene un valor tanto económico como nutritivo para las poblaciones de pocos recursos. Se cree que afecta la fertilidad masculina, porque los hombres andinos lo relacionan con impotencia y disminución de la capacidad fecundante. Estudios hechos en ratas que se alimentaron con mashua demostraron que hubo un 45% de decrecimiento de la tasa testosterona/dihidrotestosterona. El efecto de esta planta en la reproducción está relacionada a su contenido de isotiocianatos, compuestos que se unen covalentemente a las proteínas, las cuales pueden estar directa o indirectamente involucradas en el proceso espermatogénico. El propósito de esta investigación fue evaluar el efecto del extracto acuoso de la mashua sobre la espermatogénesis y la fisiología reproductiva de ratones. Métodos: Se evaluaron los parámetros morfofuncionales in vivo de espermios de ratones (espermatograma) y se cuantificó la expresión de: Cytochrome P450 17α-hydroxylase/17,20-lyase, proteína reguladora de esteroidogénesis aguda, ciclina y protamina, relacionados a la espermatogénesis. Resultados: A los 7, 14 y 21 días de dosificación, se vio afectado el conteo de espermatozoides, así como su motilidad progresiva (MP); por otra parte, se observó un retardo en la maduración de los mismos. En cuanto a la expresión génica, no se encontró diferencias significativas entre la expresión de los dos genes estudiados (cytochrome P450 17α-hydroxylase/17,20-lyase, ciclina). Conclusión: El efecto de la mashua no se da a nivel de la expresión de los genes involucrados en la espermatogénesis, sino a nivel de sus funciones como proteína.

Introduction: Tropaeolum tuberosum, known as "mashua" is an Andean tuber that holds both economic and nutritional value for low-income populations. It is believed that it affects male fertility because Andean men associate it with impotence and decreased fertility. Studies conducted on rats fed with "mashua" showed that there was a 45% decrease in the testosterone/dihydrotestosterone ratio. The effect of this plant on reproduction is related to its content of isothiocyanates, compounds that covalently bind to proteins, which may be directly or indirectly involved in the spermatogenic process. The purpose of this research was to evaluate the effect of the aqueous extract of "mashua" on spermatogenesis and reproductive physiology of mice. Methods: In vivo morphofunctional parameters of mouse sperm (spermatogram) were evaluated and the expression of Cytochrome P450 17α-hydroxylase/17,20-lyase, acute steroidogenesis regulatory protein, cyclin, and protamine related to spermatogenesis was quantified. Results: The results indicated that at 7, 14 and 21 days of dosing, the sperm count was affected, as well as their progressive motility (PM), on the other hand, a delay in their maturation was observed. Regarding gene expression, no significant differences were found between the expression of the two genes studied (Cytochrome P450 17α-hydroxylase/17,20-lyase, Cyclin). Conclusion: The effect of "mashua" does not occur at the level of gene expression involved in spermatogenesis, but at the level of its functions as a protein.

O papel dos RNAs longos não codificantes na insuficiência cardíaca: uma revisão de literatura / The role of non-coding long RNAs in heart failure: a literature review / El papel de las RNAs largas no codificantes en la insuficiencia cardiaca: una revisión de la literatura

A Insuficiência Cardíaca (IC) é uma das principais causas de internação hospitalar no mundo e tem um elevado grau de morbidade e mortalidade, sendo um grave problema de saúde pública. Os lncRNAs (RNAs longo não codificantes), têm funções regulatórias transcricionais e/ou pós transcricionais bem complexas e que ainda não são totalmente claras, mas que podem exercer influência sobre as doenças cardiovasculares, dentre elas a IC. Assim o estudo teve como objetivo identificar na literatura o papel dos lncRNAs na patogênese da IC por meio de uma revisão integrativa com busca sistemática. Foram considerados elegíveis para leitura e composição do estudo 33 artigos e os principais papéis dos lncRNA na IC foram relatados como possíveis marcadores biológicos para diagnóstico e prognóstico da doença devido a sua expressividade na corrente sanguínea. Além disso, os lncRNAs podem estar relacionados à capacidade funcional uma vez que o aumento ou diminuição de sua expressão promove redução da apoptose de células endoteliais, melhora a disfunção cardíaca, distúrbios de contratilidade e dos canais de cálcio em pacientes com IC. Portanto, os lncRNAs parecem estar envolvidos na patogênese e/ou fisiopatologia da IC, podendo ser utilizados como biomarcadores genéticos com sensibilidade e especificidade semelhantes ou superiores aos empregados atualmente no diagnóstico e prognóstico da IC.

Heart Failure (HF) is one of the main causes of hospitalization worldwide and has a high degree of morbidity and mortality being considered a public health pro- blem. lncRNAs (non-coding long RNAs) have very complex transcriptional and/or post- transcriptional regulatory functions that are still not entirely clear but may influence car- diovascular diseases, including HF. Thus, the study aimed to identify in the literature the role of lncRNAs in the pathogenesis of HF through an integrative review with a systema- tic search. A total of 33 articles were considered eligible for reading and composition of the study. The roles of lncRNA in HF were reported as possible biological markers for the diagnosis and prognosis of the disease due to its expressiveness in the bloodstream. In addition, lncRNAs may be related to functional capacity since the increase or decrease in their expression promotes a reduction in endothelial cell apoptosis, and improves car- diac dysfunction, contractility, and calcium channel disorders in patients with HF. The- refore, lncRNAs seem to be involved in the pathogenesis and/or pathophysiology of HF and can be used as genetic biomarkers with sensitivity and specificity similar or superior to those currently employed in the diagnosis and prognosis of HF.

La Insuficiencia Cardiaca (IC) es una de las principales causas de hospita- lización en el mundo y tiene un alto grado de morbimortalidad considerándose un pro- blema de salud pública. Los lncRNAs (ARN largos no codificantes) tienen funciones re- guladoras transcripcionales y/o post-transcripcionales muy complejas que aún no están del todo claras pero que pueden influir en las enfermedades cardiovasculares, incluida la IC. Así pues, el estudio se propuso identificar en la literatura el papel de los lncRNAs en la patogénesis de la IC mediante una revisión integradora con una búsqueda sistemática. Un total de 33 artículos fueron considerados elegibles para su lectura y composición del estudio. Las funciones de los lncRNA en la IC se señalaron como posibles marcadores biológicos para el diagnóstico y pronóstico de la enfermedad debido a su expresividad en el torrente sanguíneo. Además, los lncRNAs pueden estar relacionados con la capacidad funcional, ya que el aumento o disminución de su expresión promueve una reducción de la apoptosis de las células endoteliales y mejora la disfunción cardiaca, la contractilidad y los trastornos de los canales de calcio en pacientes con IC. Por tanto, los lncRNAs parecen estar implicados en la patogénesis y/o fisiopatología de la IC y pueden ser utili- zados como biomarcadores genéticos con sensibilidad y spe-cificidad similares o superi- ores a los empleados actualmente en el diagnóstico y pronóstico de la IC.

Alteraciones de la expresión génica en la infección por SARS-CoV-2 en distintos modelos de estudio / Alterations of gene expression in SARS-CoV-2 infection in different study models

Objetivo: La pandemia por SARS-CoV-2 ha supuesto un auténtico reto para el mundo científico debido a la rápida transmisión y elevada mortalidad que produce este nuevo coronavirus. La enfermedad asociada se ha denominado COVID-19 y abarca desde casos asintomáticos hasta graves que evolucionan rápidamente a síndrome de distrés respiratorio agudo, alteraciones multisistémicas y la muerte. La comunidad científica ha aunado esfuerzos para tratar de conocer mejor el proceso fisiopatológico de la infección con la intención de combatir de forma más eficaz la enfermedad. En este trabajo presentamos un estudio para conocer las alteraciones de la expresión génica provocadas por la infección. Metodología: Se han usado tres modelos de estudio distintos: cultivos de células epiteliales bronquiales, organoides de las vías respiratorias y muestras obtenidas de autopsias en pacientes, con y sin infección por SARS-CoV-2. Se han analizado los perfiles de expresión alterados por la infección en cada modelo, así como las categorías funcionales enriquecidas. Resultados: Solo 4 genes son comunes en los tres tipos de modelos de estudio, siendo el modelo de autopsias el más dispar. Dentro de los genes comunes en los modelos de cultivo celular y organoide de pulmón encontramos funciones relacionadas con procesos inflamatorios. Conclusiones: Los estudios in vitro son un buen modelo para tener una foto fija de las alteraciones en los patrones de infección, mientras que las autopsias no son un buen modelo debido al sesgo provocado por la necrosis. (AU)

Short summary: Three different study models have been used to study the gene expression profiles produced by SARS-CoV-2: bronchial epithelial cell cultures, airway organoids, and autopsy samples from patients with and without SARS-infection. CoV-2. Basis: The SARS-CoV-2 pandemic has been a real challenge for the scientific world due to the rapid transmission and high mortality caused by this new coronavirus. The associated disease has been named COVID-19 and ranges from asymptomatic to severe cases that rapidly progress to acute respiratory distress syndrome, multisystem disorders, and death. The scientific community has joined efforts to try to better understand the pathophysiological process of the infection with the intention of combating the disease more effectively. In this work we present a study to determine the alterations in gene expression caused by the infection. Methods: Three different study models have been used: bronchial epithelial cell cultures, airway organoids, and samples obtained from autopsies in patients with and without SARS-CoV-2 infection. The expression profiles altered by the infection in each model have been analyzed, as well as the functional categories enriched. Results: Only 4 genes are common in the three types of study models, the autopsy model being the most disparate. Within the common genes in cell and organoid culture models of the lung, we find functions related to inflammatory processes. Conclusions: In vitro studies are a good model to have a snapshot of alterations in infection patterns, while autopsies are not a good model due to bias caused by necrosis. (AU)

Satellite cell activation and signaling pathway response in joint exercise athletes / Ativação de células satélites e resposta na via de sinalização nos exercícios articulares dos atletas / Activación de las células satélite y respuesta de la vía de señalización en los ejercicios articulares de los atletas

ABSTRACT Introduction: Skeletal muscle satellite cells are considered the unique source of stem cells for myogenic differentiation of adult skeletal muscle cells. Upon stimulation, the skeletal muscle satellite cell can be activated through specific signaling pathways, proliferate and differentiate into a muscle cell. An analysis of the effects of key signaling pathways could provide the basis for an in-depth study of skeletal muscle formation in athletes and muscle development. Objective: This paper analyzes the effects of key signaling pathways on skeletal muscle satellite cell proliferation and differentiation. Methods: We divided 32 athletes into four groups: control, stretching, experimental, and mixed groups. The control group received no training at all, the stretching group and the experimental group received stretching training on the right gastrocnemius. The mixed group also got weight climbing training in the stretching training, initial load 30% of the athlete's weight, increasing 25% each week until 100% of body weight, at the frequency of 3 times a week. After training, gene expression of live satellite cells was measured by intramuscular signaling. Results: The FGM level of the antagonistic group (3.56±0.21) was higher than in the control group (3.25±0.18). The gene expression of HGF mRNA was higher in the mixed group (2.16±0.24) followed by the antagonistic group (2.02±0.15), the stretching group (1.81±0.25), and the control group (1.03±0.06). Conclusion: Both stretching and antagonistic training can increase gene expression in signaling pathways. Antagonistic training significantly increased the expression of HGF, MGF, and mRNA. This activity can promote muscle bulking and skeletal muscle enlargements. Evidence Level II; Therapeutic Studies - Investigating the result.

RESUMO Introdução: As células satélites musculares esqueléticas são consideradas a única fonte de células-tronco para a diferenciação miogênica das células musculares esqueléticas adultas. Após a estimulação, a célula satélite muscular esquelética pode ser ativada através de vias de sinalização específicas, proliferar e diferenciar-se em célula muscular. Uma análise sobre os efeitos das principais vias de sinalização poderia estabelecer as bases para um estudo aprofundado da formação muscular esquelética nos atletas e do desenvolvimento muscular. Objetivo: Este artigo analisa os efeitos das principais vias de sinal na proliferação e diferenciação das células satélites musculares esqueléticas. Métodos: Dividimos 32 atletas em quatro grupos. Grupos controle, alongamento, experimental e grupo misto. O grupo controle não recebeu treinamento algum, o grupo de alongamento e o grupo experimental receberam treinamento de alongamento no gastrocnêmio direito. O grupo misto também obteve treinamento de escalada com peso no treino de alongamento, carga inicial de 30% do peso do atleta, aumentando 25% em cada semana até 100% do peso corporal. Na frequência de 3 vezes por semana. Após os treinos, a expressão genética das células satélites vivas foi medida por intermédio da sinalização proveniente de coleta intramuscular. Resultados: O nível de MGF do grupo antagônico (3.56±0.21) foi maior que no grupo controle (3.25±0.18). A expressão gênica do mRNA HGF foi maior no grupo misto (2.16±0.24) seguido pelo antagônico (2.02±0.15), o grupo de alongamento (1.81±0.25) e o grupo controle (1.03±0.06) Conclusão: Tanto o treinamento de alongamento quanto o treinamento antagônico podem aumentar a expressão genética nas vias de sinalização. O treinamento antagônico aumentou significativamente a expressão de HGF, MGF e mRNA. Essa atividade pode promover volume e hipertrofia muscular. Nível de evidência II; Estudos terapêuticos - investigação dos resultados do tratamento.

RESUMEN Introducción: Las células satélite del músculo esquelético se consideran la única fuente de células madre para la diferenciación miogénica de las células musculares esqueléticas adultas. Tras la estimulación, la célula satélite del músculo esquelético puede activarse a través de vías de señalización específicas, proliferar y diferenciarse en una célula muscular. Un análisis sobre los efectos de las vías de señalización clave podría sentar las bases para un estudio en profundidad de la formación del músculo esquelético en los atletas y del desarrollo muscular. Objetivo: Este trabajo examina los efectos de las vías de señalización clave en la proliferación y diferenciación de las células satélite del músculo esquelético. Métodos: Dividimos a 32 atletas en cuatro grupos. Grupos de control, de estiramiento, experimentales y mixtos. El grupo de control no recibió ningún entrenamiento, el grupo de estiramiento y el grupo experimental recibieron un entrenamiento de estiramiento en el gastrocnemio derecho. El grupo mixto también recibió entrenamiento de escalada con pesas en el entrenamiento de estiramiento, con una carga inicial del 30% del peso del atleta, aumentando un 25% cada semana hasta el 100% del peso corporal. Con una frecuencia de 3 veces por semana. Tras el entrenamiento, se midió la expresión génica de las células satélite vivas mediante la señalización de la recogida intramuscular. Resultados: El nivel de FGM del grupo antagonista (3,56±0,21) fue mayor que en el grupo de control (3,25±0,18). La expresión génica del ARNm del HGF fue mayor en el grupo mixto (2,16±0,24), seguido del grupo antagonista (2,02±0,15), el grupo de estiramiento (1,81±0,25) y el grupo de control (1,03±0,06) Conclusión: Tanto el entrenamiento de estiramiento como el antagonista pueden aumentar la expresión génica en las vías de señalización. El entrenamiento antagónico aumentó significativamente la expresión de HGF, MGF y mRNA. Esta actividad puede promover el aumento de volumen muscular y la hipertrofia. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - Investigación de resultados.

La sucralosa promueve la polarización a macrófagos proinflamatorios M1

RESUMEN La sucralosa es un edulcorante no calórico de amplio consumo a nivel mundial, es considerado como un aditivo seguro, debido a que es eliminado en periodos cortos de tiempo. Recientemente se evidenció su bioacumulación en tejido adiposo, donde se encuentran inmersos macrófagos, células del sistema inmune involucradas en el desarrollo de la inflamación sistémica de bajo grado. A la fecha, no se cuenta con suficiente información para demostrar si los edulcorantes potencian los procesos inflamatorios alterando la función de células presentes en tejido y/o contribuyen en el desarrollo de patologías metabólicas. Por lo anterior, en nuestro trabajo se evaluó el efecto de la sucralosa en la viabilidad de los macrófagos diferenciados de la línea celular monocítica THP-1, por azul de tripán y ensayos de MTT, así como su efecto en la polarización M1/M2 por PCR según la expresión de IRF4, IRF5, STAT1, STAT6, perfil de expresión de IL-6, IL-12, TNF-α, TGF-β, IL-10 y SOCS3 por qPCR, y la cuantificación de la quimiocina IP-10 por ELISA. Los resultados indicaron que la sucralosa no tiene efectos citotóxicos, pero disminuye el número de células viables metabólicamente activas determinadas por MTT de manera dependiente de la concentración. La sucralosa incrementa la concentración de la quimiocina IP-10 y la expresión génica del factor de transcripción IRF5 y disminuye la expresión de IRF4 y STAT6, favoreciendo la polarización hacia poblaciones M1. La bioacumulación de sucralosa en tejido adiposo, y su interacción con macrófagos, podría inducir su polarización a M1.

ABSTRACT Sucralose is a non-nutritive sweetener widely consumed worldwide; it is considered a safe additive because it is eliminated quickly. Recently its bioaccumulation in adipose tissue was evidenced, where macrophages, cells of the immune system involved in developing low-grade systemic inflammation, are found. To date, there is a paucity of information regarding whether sweeteners potentiate inflammatory processes by altering the function of cells present in tissue and/or contribute to the development of metabolic pathologies. We evaluate the effect of sucralose on the viability of differentiated macrophages of the monocytic cell line THP-1, by trypan blue and MTT assays, respectively, as well as its effect on M1/ M2 by PCR according to the expression of IRF4, IRF5, STAT1, STAT6, expression profile of IL6, IL-12, TNF-α, TGF-β, IL-10 and SOCS3 by qPCR, and the quantification of the chemokine IP-10 by ELISE. The results indicated that sucralose has no cytotoxic effects but decreases the number of metabolically active viable cells determined by MTT of macrophages in a concentration-dependent manner. Sucralose increased the concentration of the chemokine IP-10 and the gene expression of the transcription factors IRF5 and decreased the expression of IRF4 and STAT 6 gene expression, favoring polarization towards M1 populations. The bioaccumulation of sucralose in adipose tissue, and its interaction with macrophages, could induce its polarization to M1.

Expresión de miRNAs en orina como herramienta de diagnóstico y pronóstico en cáncer de próstata / Expression of urine miRNAs as a diagnostic and prognostic tool in prostate cancer

Resumen Introducción: El cáncer de próstata es la principal causa de muerte por cáncer en México, el diagnóstico inicial se hace mediante la medición del antígeno prostático específico y el tacto rectal de la próstata. Sin embargo, hay limitaciones que incluye la capacidad para distinguir con precisión los pacientes con y sin cáncer y aquellos que presentan una forma agresiva de la enfermedad. Los microRNAs se encuentran alterados en el tejido prostático canceroso, incluyendo aquellos casos fármaco resistentes. Los miRNAs son reguladores de la expresión génica y se encuentran involucrados en diversos procesos patológicos. Se ha demostrado que estas moléculas son detectables en orina. Objetivo: Esta revisión presenta la información sobre cuáles son los miRNAs reportados en orina como posibles marcadores para el diagnóstico, pronóstico y respuesta a la terapia en cáncer de próstata. Resultados: De la búsqueda realizada en la bibliografía, se encontraron 13 miRNAs en los diferentes estudios, miR-19a, miR-19b, miR-21, miR-148a, miR-375, miR-125b-5p, miR-151-5p, miR-141, miR-200b, miR-221, miR-107, miR-26b-5p, miR-205-5p. Teniendo algunos miRNAs como miR-375, miR-21, miR-141 encontrados en varios estudios. Limitaciones del estudio o implicaciones: Se puede concluir es factible obtener la medición por métodos no invasivos de miRNAs en pacientes con cáncer de próstata. Originalidad o valor: Es un estudio de revisión respecto a los miRNAs obtenidos en muestras de orina en pacientes con cáncer de próstata.

Abstract Introduction: Prostate cancer is the leading cause of cancer death in Mexico, the initial diagnosis is made by measuring the Prostate Specific Antigen and the digital rectal examination of the prostate. However, there are limitations including the ability to accurately distinguish patients with and without cancer and those with an aggressive form of the disease. MicroRNAs are altered in cancerous prostate tissue, including drug-resistant cases. MiRNAs are regulators of gene expression and are involved in various pathological processes. These molecules have been shown to be detectable in urine. Objective: This review presents the information on which are the miRNAs reported in urine as possible markers for the diagnosis, prognosis and response to therapy in prostate cancer. Results: From the literature search, 13 miRNAs were found in the different studies, miR-19a, miR-19b, miR-21, miR-148a, miR-375, miR-125b-5p, miR-151-5p , miR-141, miR-200b, miR-221, miR-107, miR-26b-5p, miR-205-5p. Having some miRNAs like miR-375, miR-21, miR-141 found in various studies. Limitations of the study or implications: It can be concluded that it is feasible to obtain the measurement of miRNAs by non-invasive methods in patients with prostate cancer. Originality or value: It is a review study regarding miRNAs obtained in urine samples in patients with prostate cancer.

Estudio genómico de la Quinua (Chenopodium quinoa Willd): técnicas de secuenciación e identificación genómica. Una revision. / Genomic study of Quinoa (Chenopodium quinoa Willd): sequencing techniques and genomic identification. A review.

INTRODUCCIÓN. La quinua (Chenopodium quinoa Willd), es considerado uno de los alimentos más completos debido a su alto contenido en ácidos grasos, oligoelementos y proteínas ricas en aminoácidos esenciales; sin embargo, también posee metabolitos con propiedades anti nutricionales (saponinas) que deben ser eliminados antes de su consumo. Algunos estudios realizados en el genoma de la quinua, se han basado en la identificación de genes involucrados en la producción de saponinas para inhibir su expresión y evitar los tratamientos de pos cosecha (escarificado). OBJETIVO. Establecer, mediante revisión bibliográfica, las técnicas de biología molecular aplicadas a la expresión genómica de saponinas en quinua (Chenopodium quinoa Willd) MÉTODOS. La revisión bibliográfica, se realizó tomando en cuenta varias fuentes de información, entre ellas: tesis doctorales, artículos científicos, libros y algunas plataformas WEB (www.bbc.com, www.fao.org, www.sidalc.net y https://biología.laguía2000.com) con principal interés en: genoma de la quinua, técnicas de secuenciación, genes identificados y su posterior expresión génica. CONCLUSIONES. El descubrimiento del genoma completo de la quinua en el año 2017, aplicando la técnica SMTR u otras técnicas como la pirosecuenciación, fue el punto de partida para el estudio de genes que le proporciona su adaptabilidad a varias condiciones bióticas y abióticas. De esta manera, en relación a los factores abióticos, se documentó en dos oportunidades que la expresión génica de saponinas, estaba relacionada con genes del citocromo P450 y enzimas como las glucosil transferasas. Ahora bien, aunque los genes involucrados en la respuesta a los agentes bióticos aún no están identificados, este se mantiene como hipótesis relacionándose con el contenido de saponinas.

INTRODUCTION. Quinoa (Chenopodium quinoa Willd), is considered one of the most complete foods due to its high content of fatty acids, trace elements and proteins rich in essential amino acids; however, it also has metabolites with anti-nutritional properties (saponins) that must be eliminated before consumption. Some studies carried out on the quinoa genome have been based on the identification of genes involved in the production of saponins to inhibit their expression and avoid post-harvest treatments (scarification). OBJECTIVE. To establish, through bibliographic review, the molecular biology techniques applied to the genomic expression of saponins in quinoa (Chenopodium quinoa Willd). METHODS. The bibliographic review was carried out taking into account several sources of information, among them: doctoral theses, scientific articles, books and some WEB platforms (www.bbc.com, www.fao.org, www.sidalc.net and https://biología.laguía2000.com) with main interest in: quinoa genome, sequencing techniques, identified genes and their subsequent gene expression. CONCLUSIONS. The discovery of the complete genome of quinoa in 2017, applying the SMTR technique or other techniques such as pyrosequencing, was the starting point for the study of genes that provide its adaptability to various biotic and abiotic conditions. Thus, in relation to abiotic factors, it was reported on two occasions that the gene expression of saponins was related to cytochrome P450 genes and enzymes such as glucosyl transferases. Although the genes involved in the response to biotic agents have not yet been identified, this remains a hypothesis related to the content of saponins.

Un tratamiento "a la carta" para los pacientes con adenocarcinoma pancreático / An "à la carte" treatment for patients with pancreatic adenocarcinoma

Resumen El adenocarcinoma pancreático es una enfermedad heterogénea. Sin dudas la aparición y la acumulación de mutaciones genéticas promueven el desarrollo del adenocarcinoma pancreático. Sin embargo, de manera contra-intuitiva, los análisis genéticos, por más precisos y profundos que sean, no permi ten la estratificación de los pacientes para predecir la evolución clínica ni para seleccionar el tratamiento más eficaz para cada paciente. Esto es debido a que la evolución clínica y la sensibilidad a los tratamientos están asociadas con su fenotipo, el que, a su vez, está determinado por la expresión global de los genes, es decir están regulados a nivel transcriptómico. Por lo tanto, la estratificación de esos pacientes debe hacerse a través de la lectura transcriptómica y no a través de su análisis genético. Los datos obtenidos sobre grandes cohortes de pacientes indican que el estudio de un conjunto de transcriptos seleccionados podría predecir la evolución clínica y ayudar a decidir el tratamiento más apropiado. Se está avanzando rápidamente hacia una medicina personalizada para esta enfermedad, que de por sí tiene un mal pronóstico, pero que es aún peor si la deci sión terapéutica no es la más adaptada a cada paciente. Estamos convencidos de que en un futuro próximo el tratamiento de los cánceres estará precedido por una caracterización transcriptómica extensa con el fin de seleccionar los tratamientos "a la carta" más adecuados.

Abstract Pancreatic adenocarcinoma is a heterogeneous disease. Undeniably, the appearance and accumulation of genetic muta tions promote the development of pancreatic adenocarcinoma. However, counterintuitively, genetic analyzes, no matter how precise and in-depth they may be, do not allow stratification of patients to predict their clinical evolution or to select the most effective treatment in each case. This is due to the fact that the clinical evolution and sensitivity to treatments are associated with the tumoral phenotype, which, in turn, is determined by the global expression of genes that is regulated at the transcriptomic level. Therefore, the stratification of these patients must be done by analysis at the transcriptomic level and not by genetic analysis. The data obtained from large cohorts of patients indicate that studying the transcription of a selected set of genes could predict the clinical outcome and can help to decide about the most appropriate treatment. We are moving very rapidly towards a personalized medicine for this disease, which in itself has a poor prognosis, even worse if the therapeutic deci sion is not the most adapted to each patient. We are convinced that in the near future the treatment of cancers will be preceded by an extensive transcriptomic characterization in order to select the most suitable "à la carte" treatments.

Up-regulation of Arl4a gene expression by broccoli aqueous extract is associated with improved spermatogenesis in mouse testes / La regulación positiva de la expresión del gen Arl4a por acción del extracto acuoso de brócoli se asocia con una mejor espermatogénesis en testículos de ratón

Abstract | Introduction: Broccoli (Brassica oleracea) is well known for its properties as an anticancer, antioxidant, and scavenger of free radicals. However, its benefits in enhancing spermatogenesis have not been well established. Objective: To study broccoli aqueous extract effects on sperm factors and the expression of genes Catsper1, Catsper2, Arl4a, Sox5, and Sox9 in sperm factors in mice. Materials and methods: Male mice were divided randomly into six groups: (1) Control; (2) cadmium (3 mg/kg of mouse body weight); (3) orally treated with 200 µl broccoli aqueous extract (1 g ml-1); (4) orally treated with 400 µl of broccoli aqueous extract; (5) orally treated with 200 broccoli aqueous extract plus cadmium, and (6) orally treated with 400 µl of broccoli aqueous extract plus cadmium. We analyzed the sperms factors and Catsper1, Catsper2, Arl4a, Sox5, and Sox9 gene expression. Results: An obvious improvement in sperm count and a slight enhancement in sperm motility were observed in mice treated with broccoli extract alone or with cadmium. Sperm viability was reduced by broccoli extract except for the 200 µl dose with cadmium, which significantly increased it. Interestingly, Arl4a gene expression increased in the 400 µl broccoli- treated group. Likewise, the Arl4a mRNA level in mice treated with cadmium and 200 µl of broccoli extract was higher than in the cadmium-treated mice. Furthermore, broccoli extract enhanced the mRNA level of Catsper2 and Sox5 genes in mice treated with 200 µl and 400 µl broccoli extract plus cadmium compared with the group treated solely with cadmium. Conclusion: The higher sperm count in broccoli-treated mice opens the way for the development of pharmaceutical products for infertile men.

Resumen | Introducción. El brócoli (Brassica oleracea) se conoce por sus propiedades como anticancerígeno, antioxidante y eliminador de radicales libres. Sin embargo, sus beneficios en la espermatogénesis aún no se han determinado suficientemente. Objetivo. Estudiar los efectos del extracto acuoso de brócoli sobre los factores espermáticos y la expresión de los genes Catsper1, Catsper2, Arl4a, Sox5 y Sox9 en ratones. Materiales y métodos. Los ratones machos se dividieron aleatoriamente en seis grupos: 1) control; 2) tratados con cadmio, 3 mg/kg de peso corporal; 3) tratados con 200 µl de extracto acuoso de brócoli (1 g ml-1); 4) tratados con 400 µl de extracto acuoso de brócoli; 5) tratados con 200 µl de extracto acuoso de brócoli más cadmio, y 6) tratados con 400 µl de extracto acuoso de brócoli más cadmio. El extracto acuoso de brócoli se administró por vía oral. Se analizaron los factores espermáticos y la expresión de los genes Catsper1, Catsper2, Arl4a, Sox5 y Sox9. Resultados. Se observó una mejoría obvia en el recuento y una ligera mejoría en la motilidad de los espermatozoides, en ratones tratados con extracto de brócoli solo o con cadmio. La viabilidad de los espermatozoides se redujo con el extracto de brócoli, excepto con la dosis de 200 µl más cadmio, la cual la aumentó significativamente. Curiosamente, la expresión del gen Arl4a aumentó en el grupo tratado con 400 µl del extracto. Asimismo, el ARNm del Arl4a en ratones tratados con cadmio y 200 µl del extracto, fue más abundante que en los ratones tratados solo con cadmio. Además, el extracto de brócoli aumentó la cantidad de ARNm de los genes Catsper2 y Sox5 en ratones tratados con 200 y 400 µl de extracto de brócoli más cadmio, en comparación con el grupo tratado únicamente con cadmio. Conclusión. El mayor número de espermatozoides en ratones tratados con brócoli abre el camino al desarrollo de productos farmacéuticos para hombres infértiles.

Sistemas de expresión de proteínas recombinantes para el análisis funcional de antígenos de Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax: una revisión / Recombinant Protein Expression Systems for Functional Analysis of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax Antigens: A Review / Sistemas de expressão de proteínas recombinantes para o analise funcional de antígenos de Plasmodium falciparum e Plasmodium vivax: uma revisão

Introducción: Para diseñar vacunas es necesario comprender la función de los antígenos de Plasmodium spp. in-volucrados en la invasión a células hospederas. Diferentes investigaciones han generado proteínas recombinantes utilizando sistemas de expresión heterólogos y así han obtenido moléculas semejantes a las nativas. Con estos avances se desarrollan estrategias que bloquean la infección de estos patógenos. Objetivo: Describir las características y los aspectos metodológicos más importantes de los sistemas de expresión de las proteínas recombinantes en estudios funcionales de Plasmodium spp. Metodología: Revisión descriptiva de estudios publicados en Pubmed, Science Direct, Embase y Medline, entre 2010 y 2020, que incluyeran sistemas recombinantes en células de Escherichia coli, de mamífero y sistemas libres de células, para estudios funcionales de antígenos de Plasmodium falciparum y Plasmodium vivax. Se revisaron 70 artículos originales y 58 cumplieron con los criterios establecidos. Resultados: Obtener proteínas recombinantes mediante un sistema procariota, de mayor rendimiento y bajo costo, ha permitido estudiar un número importante de antígenos. Los sistemas con células de mamífero y libres de células, que permiten modificaciones postraduccionales y plegamiento adecuado de moléculas, se usan para producir librerías de antígenos con estructura conformacional similar a la nativa. Conclusión: El estudio de los antígenos de Plasmodium spp. implicados en la infección y desarrollo de células diana requiere una adecuada selección del método de producción recombinante. El refinamiento de procesos de expresión en sistemas procariotas, eucariotas e in vitro, mediante ingeniería genética y cultivo celular, permitirá mejores rendimientos y menor costo.

Introduction: Understanding the function of Plasmodium spp. Antigens involved in invasion of host cells is necessary to design vaccines. Different studies have generated recombinant proteins using heterologous expression systems, obtaining molecules similar to native ones. These advances are es-sential to develop strategies that block the infection of these pathogens. Objective: Describe the most important characteristics and methodological aspects of recombinant protein expression systems in functional studies of Plasmodium spp. Methodology: Descriptive review of studies published in Pubmed, Science Direct, Embase and Medline, between 2010 and 2020, that included recombinant systems in Escherichia coli cells, mam-malian and cell-free, for functional studies of Plasmodium falciparum and Plasmodium vivax antigens. 70 original articles were reviewed, 58 met the established criteria. Results: Obtaining recombinant proteins by means of a prokaryotic system, with higher performance and low cost, has allowed functional studies of a significant number of antigens. Mammalian cell and cell free systems, which allow for post-translational modifications and adequate folding of molecules, are used to produce antigen libraries with native-like conformational structure. Conclusion:Plasmodium spp. antigen study involved in infection and development in target cells, re-quires adequate selection of the recombinant production method. The refinement of expression pro-cesses in prokaryotic, eukaryotic and in vitro systems, through genetic engineering and cell culture, will allow better yields and lower cost

Introdução: Para desenvolver vacinas, é necessário entender a função dos antígenos de Plasmodium spp. envolvidos na invasão das células hospedeiras. As pesquisas têm gerado proteínas recombinan-tes utilizando sistemas de expressão heterólogos para obter moléculas similares às nativas. Com estes avanços, estratégias que bloqueiam a infecção destes patógenos estão sendo desenvolvidas. Objetivo: Descrever as características mais importantes e aspectos metodológicos dos sistemas de expressão de proteínas recombinantes em estudos funcionais de Plasmodium spp. Metodologia: Revisão descritiva dos estudos publicados em Pubmed, Science Direct, Embase e Medline, entre 2010 e 2020, que incluíram sistemas recombinantes em células de Escherichia coli, de mamífero e sistemas livres de células, para estudos funcionais dos antígenos de Plasmodium fal-ciparum e Plasmodium vivax. Setenta artigos originais foram revisados e 58 preenchiam os critérios estabelecidos. Resultado: A obtenção de proteínas recombinantes usando um sistema procariótico, com maior rendimento e baixo custo, permitiu o estudo de um número significativo de antígenos. Sistemas de células mamíferas e sem células, que permitem modificações pós-tradução e dobramento adequado das moléculas, são usados para produzir bibliotecas de antígenos com uma estrutura semelhante à nativa. Conclusão: O estudo dos antígenos Plasmodium spp. envolvidos na infecção e no desenvolvimento das células-alvo requer uma seleção adequada do método de produção recombinante. O refinamento dos processos de expressão em sistemas procarióticos, eucarióticos e in vitro, através da engenharia genética e da cultura celular, permitirá melhores rendimentos e menores custos.

Effects of pueraria lobata combined with high-intensity intermittent training on skeletal muscle quality and gene expression / Efeitos da pueraria lobata combinados com treino intermitente de alta intensidade na qualidade músculoesquelética e expressão genética / Efecto de pueraria lobata y entrenamiento intermitente de alta intensidad sobre la calidad del músculo esquelético y la expresión génica

ABSTRACT Extraction of effective components from Pueraria lobata has important value for skeletal muscle quality and gene expression. The improvement effect of traditional high-intensity intermittent training on skeletal muscle has not been obvious, and it is difficult to guarantee the properties of some volatiles. Based on this, this paper analyzes the effect of high-intensity intermittent training on skeletal muscle quality and gene expression in Pueraria lobata. Based on a brief summary of extraction of Pueraria lobata, status of research on the pharmaceutical components of Pueraria lobata was summarized. Different specimens of Pueraria lobata were selected as research objects, and the process of high-intensity intermittent training was designed. High-intensity intermittent training, solvent extraction and water solvent extraction were combined together to design the fixed-bed continuous extraction scheme. According to the influence of Pueraria lobata on skeletal muscle quality, the influence of intermittent training on skeletal muscle quality was analyzed. The extraction results showed that Pueraria lobata combined with high-intensity intermittent training can effectively improve the content of skeletal muscle and ensure the effective expression of skeletal muscle gene.

RESUMO A extração de componentes eficazes da Pueraria lobata tem importante valor para a qualidade músculoesquelética e para a expressão genética. O efeito da melhoria do tradicional treinamento intervalado de alta intensidade na estrutura músculoesquelética não tem sido óbvio, e é difícil garantir as propriedades de alguns voláteis. Com base nisso, este estudo analisa o efeito do treinamento intervalado de alta intensidade na qualidade músculoesquelética e na expressão genética na Pueraria lobata. Com base num breve resumo da extração da Pueraria lobata, resumiu-se o andamento das pesquisas sobre os componentes farmacêuticos da Pueraria lobata. Diferentes amostras de Pueraria lobata foram selecionadas como objeto de pesquisa, e formulou-se o processo do treinamento intervalado de alta intensidade. O treinamento intervalado de alta intensidade, a extração de solventes e a extração de solventes à base de água foram combinadas para conceber o sistema de extração contínua de leito fixo. De acordo com a influência da Pueraria lobata na qualidade músculoesquelética, analisou-se a influência do treino intervalado na qualidade músculoesquelética. Os resultados da extração mostraram que a Pueraria lobata, combinada com treino intervalado de alta intensidade, pode melhorar, de maneira eficaz, o teor músculoesquelético e garantir a expressão eficaz da expressão genética do músculoesquelético.

RESUMEN La extracción de componentes eficaces de la Pueraria lobata tiene un importante valor para la calidad músculoesquelética y para la expresión genética. El efecto de la mejora del tradicional entrenamiento intercalado de alta intensidad en la estructura músculoesquelética no ha sido obvio, y es difícil garantizar las propriedades de algunos volátiles. Basándose en eso, este estudio analiza el efecto del entrenamiento intercalado de alta intensidad en la calidad músculoesquelética y en la expresión genética en la Pueraria lobata. Basándose en un breve resumen de la extracción de la Pueraria lobata, se resumió el andamiento de las investigaciones sobre los componentes farmacéuticos de la Pueraria lobata. Diferentes muestras de Pueraria lobata fueron seleccionadas como objeto de investigación, y se formuló el proceso del entrenamiento intercalado de alta intensidad. El entrenamiento intercalado de alta intensidad, la extracción de solventes y la extracción de solventes a base de agua fueron combinadas para concebir el sistema de extracción continua de lecho fijo. De acuerdo con la influencia de la Pueraria lobata en la calidad músculoesquelética, se analizó la influencia del entrenamiento intercalado en la calidad músculoesquelética. Los resultados de la extracción mostraron que la Pueraria lobata, combinada con entrenamiento intercalado de alta intensidad, puede mejorar, de manera eficaz, el tenor músculoesquelético y garantizar la expresión eficaz de la expresión genética del músculoesquelético.

Desbalances genómicos del locus 9p24.1 en pacientes argentinos con linfoma de Hodgkin clásico / Genomic imbalances at 9p24.1 locus in Argentine patients with classical Hodgkin lymphoma

Resumen Introducción: El linfoma de Hodgkin clásico presenta escasas células de Reed Sternberg/Hodgkin inmersas en un abundante microambiente tumoral. Los desbalances genómicos del locus 9p24.1 han sido asociados con alteraciones en la expresión de los genes del ligando de muerte celular 1 y 2, ambos reguladores de la respuesta inmune. Objetivo: Evaluar desbalances genómicos del locus 9p24.1 en células de Reed Sternberg/Hodgkin y del microambiente tumoral en biopsias de pacientes con linfoma de Hodgkin clásico y correlacionarlo con la expresión del ligando de muerte celular 1 y la presentación de la enfermedad. Materiales y Métodos: Se efectuó hibridación in situ en biopsias de 22 pacientes con linfoma de Hodgkin clásico dirigida a los genes del ligando de muerte celular 1 y 2. Las alteraciones se clasificaron en: amplificación, ganancia y polisomía. La expresión se evaluó mediante inmunohistoquímica. Resultados: Todos los pacientes mostraron alteraciones del número de copias. Se diferenciaron dos grupos: con amplificación (32%) y sin amplificación (68%); este último subdividido en: rico en ganancia (53%) y rico en polisomías (47%). El grupo rico en polisomías mostró mayor edad (p=0,027). El 40% de los pacientes con amplificación y rico en ganancias no presentó masa bulky. La expresión proteica mostró score +3 sólo en estos últimos. El title% de los casos ricos en polisomías presentaron monosomía del cromosoma 9 en los linfocitos circundantes respecto al 36,4% de los otros dos grupos. Conclusiones: Nuestros datos constituyen un aporte a la caracterización biológica del LHC, de interés en el marco de las nuevas modalidades terapéuticas. MÉD.UIS.2020;34(1):35-44.

Abstract Background: Classical Hodgkin lymphoma shows scarce tumor Reed-Sternberg/Hodgkin cells surrounded by a dense immune microenvironment. Genetic alterations at the 9p24.1 locus result in genomic imbalances in the copy number of PD-L1/PD-L2 genes, both of them being immune response regulators. Aim: To characterize genomic imbalances at the 9p24.1 locus in Reed-Sternberg/Hodgkin cells and immune microenvironment in biopsies of patients with Classical Hodgkin lymphoma and correlate it with PD-L1 protein expression and disease presentation. Material and Methods: Paraffin embedded biopsies of 22 patients with CHL were retrospectively evaluated by fluorescence in situ hybridization using SPEC CD274/PDCD1LG2/CEN9 DNA probe. The frequency of 9p24.1 alterations, amplification, copy gain and polysomy, were determined taking into account the number of gene copies with respect to the centromere. PD-L1 protein expression was evaluated by immunohistochemistry. Results: All cases presented alterations in the number of copies of PD-L1 / PD-L2, which are differentiated in two groups: with amplification (32%) and without amplification (68%). The latter was subdivided into rich in gains (RG) (53%) and rich in polysomies (RP) (47%). Groups with amplification and RG were younger than the RP group (p = 0.027). The latter was not associated with bulky disease, a fact observed in 40% of patients with amplification and RG. Protein expression showed score +3 only in the latter. All RP cases presented chromosome 9 monosomy in the surrounding lymphocytes, compared to 36.4% of the other two groups. Conclusions: Our data contributes to the biologic characterization of CHL, of interest in the context of new therapeutic modalities. MÉD.UIS.2020;34(1):35-44

Biopsia con aguja gruesa para la determinación del perfil de expresión génica tumoral, mediante la plataforma de 70 genes / Core needle biopsy for determining tumour gene expression profile through the 70 gene signature

Objetivos Evaluar la utilidad de la biopsia ecoguiada con aguja gruesa diagnóstica (BAG1) para la determinación del perfil de expresión génica tumoral (PEG), en los tumores malignos de mama. Materiales y métodos Revisión de 130 biopsias ecoguiadas con aguja gruesa (BAG), con resultado de malignidad. Se consideraron «aptas» las muestras con, al menos, un 30% de células tumorales. Se estudió la influencia del tamaño tumoral (menor de 1 cm, entre 1-2 cm y mayor de 2 cm) y se analizaron las causas que motivaron muestras no aptas. Se utilizó la plataforma MammaPrint® (70 genes). Se evaluó la influencia del grado histológico y del riesgo genómico en los resultados. Resultados En la BAG1 se obtuvieron muestras aptas en 100 biopsias (76,92%). Entre los 36 casos en los que se utilizó la BAG para obtener el PEG, en 32 (88,89%) se realizó a partir de la BAG1. Entre los 30 casos en los que la BAG1 no resultó apta, en 26 casos no se obtuvo el porcentaje mínimo de células tumorales en la muestra. Ni el grado histológico ni el riesgo genómico influyeron en los resultados. Conclusiones Las muestras diagnósticas de la biopsia ecoguiada con aguja gruesa (BAG1) pueden ser válidas para la determinación del perfil de expresión génica. Ello facilita y acelera el proceso de evaluación pronóstica en los tumores infiltrantes de mama. Por ello, proponemos que, de manera rutinaria y ante el diagnóstico de tumor maligno infiltrante, conste el porcentaje de células tumorales en los informes anatomopatológicos. (AU)

Objectives To assess the utility of diagnostic ultrasound-guided core needle biopsy (CNB1) for determining tumour gene expression profile (GEP) in malignant breast tumours. Materials and Methods Review of 130 diagnostic ultrasound-guided core needle biopsies (CNB1) indicating malignancy. Samples with at least 30% tumour cells were considered suitable. The influence of tumour size (less than 1 cm, between 1-2 cm and greater than 2 cm) was studied and the causes of unsuitable samples were analysed. The MammaPrint® platform (70 genes) was used. The influence of histological grade and genomic risk was evaluated. Results Suitable CNB1 samples were obtained in 100 biopsies (76.92%). Among the 36 cases in which CNB was used to obtain the GEP, in 32 (88.89%) it was performed using the CNB1. Among the 30 cases in which CNB1 was not suitable, the minimum percentage of tumour cells in the sample was not obtained in 26 cases. Neither histological grade nor genomic risk influenced the results. Conclusions Diagnostic samples from ultrasound-guided biopsy (CNB1) can be valid to determine GEP. This facilitates and accelerates the prognostic evaluation process in infiltrating breast tumours. Therefore, we propose that, when diagnosing an infiltrating malignant tumour, the percentage of tumour cells should be routinely recorded in the pathology reports. (AU)

Biopsia con aguja gruesa para la determinación del perfil de expresión génica tumoral, mediante la plataforma de 70 genes / Core needle biopsy for determining tumour gene expression profile through the 70 gene signature

Objetivos Evaluar la utilidad de la biopsia ecoguiada con aguja gruesa diagnóstica (BAG1) para la determinación del perfil de expresión génica tumoral (PEG), en los tumores malignos de mama. Materiales y métodos Revisión de 130 biopsias ecoguiadas con aguja gruesa (BAG), con resultado de malignidad. Se consideraron «aptas» las muestras con, al menos, un 30% de células tumorales. Se estudió la influencia del tamaño tumoral (menor de 1 cm, entre 1-2 cm y mayor de 2 cm) y se analizaron las causas que motivaron muestras no aptas. Se utilizó la plataforma MammaPrint® (70 genes). Se evaluó la influencia del grado histológico y del riesgo genómico en los resultados. Resultados En la BAG1 se obtuvieron muestras aptas en 100 biopsias (76,92%). Entre los 36 casos en los que se utilizó la BAG para obtener el PEG, en 32 (88,89%) se realizó a partir de la BAG1. Entre los 30 casos en los que la BAG1 no resultó apta, en 26 casos no se obtuvo el porcentaje mínimo de células tumorales en la muestra. Ni el grado histológico ni el riesgo genómico influyeron en los resultados. Conclusiones Las muestras diagnósticas de la biopsia ecoguiada con aguja gruesa (BAG1) pueden ser válidas para la determinación del perfil de expresión génica. Ello facilita y acelera el proceso de evaluación pronóstica en los tumores infiltrantes de mama. Por ello, proponemos que, de manera rutinaria y ante el diagnóstico de tumor maligno infiltrante, conste el porcentaje de células tumorales en los informes anatomopatológicos. (AU)

Objectives To assess the utility of diagnostic ultrasound-guided core needle biopsy (CNB1) for determining tumour gene expression profile (GEP) in malignant breast tumours. Materials and Methods Review of 130 diagnostic ultrasound-guided core needle biopsies (CNB1) indicating malignancy. Samples with at least 30% tumour cells were considered suitable. The influence of tumour size (less than 1 cm, between 1-2 cm and greater than 2 cm) was studied and the causes of unsuitable samples were analysed. The MammaPrint® platform (70 genes) was used. The influence of histological grade and genomic risk was evaluated. Results Suitable CNB1 samples were obtained in 100 biopsies (76.92%). Among the 36 cases in which CNB was used to obtain the GEP, in 32 (88.89%) it was performed using the CNB1. Among the 30 cases in which CNB1 was not suitable, the minimum percentage of tumour cells in the sample was not obtained in 26 cases. Neither histological grade nor genomic risk influenced the results. Conclusions Diagnostic samples from ultrasound-guided biopsy (CNB1) can be valid to determine GEP. This facilitates and accelerates the prognostic evaluation process in infiltrating breast tumours. Therefore, we propose that, when diagnosing an infiltrating malignant tumour, the percentage of tumour cells should be routinely recorded in the pathology reports. (AU)

Sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPases genes differential expression in breast cancer cells.

INTRODUCTION: Sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPases (SERCA) enzymes are essential for intracellular Ca2+ homeostasis. SERCA genes (ATP2A1-3) encode for different functional isoforms of the protein, whose expression or function is altered in several types of cancer, such as gastric and oral, as well as colon, breast, lung, thyroid, liver, and prostate cancer, among others. However, the role played by SERCA pumps in carcinogenesis is unknown. METHODS: Techniques such as real-time polymerase chain reaction, optical microscopy, proliferation and cell death assays, as well as bioinformatic analyses were used. OBJECTIVES: To evaluate the expression levels of the ATP2A2 and ATP2A3 genes in cell lines representative of different subtypes of breast cancer. RESULTS: The results show that the MDA-MB-231 cell line expresses lower mRNA levels for the ATP2A3 gene in comparison with MCF-7 cells. The use of the phytoestrogen resveratrol induces ATP2A3 expression, decreases proliferation, and induces apoptosis in both cell types. CONCLUSIONS: SERCA expression might function as a tool to differentiate breast cancer subtypes, which have different treatment requirements.

INTRODUCCIÓN: Las enzimas SERCA son esenciales para la homeostasis intracelular de Ca2+. Los genes SERCA (ATP2A1-3) codifican para distintas isoformas funcionales de la proteína, cuya expresión o función se encuentra alterada en diversos tipos de cáncer, como el gástrico y el oral, así como de colon, mama, pulmón, tiroides, hígado y próstata, entre otros. Sin embargo, se desconoce el papel de las bombas SERCA en la carcinogénesis. MÉTODOS: Se utilizaron estudios como reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real, microscopia óptica, ensayos de proliferación y muerte celular, así como análisis bioinformáticos. OBJETIVOS: Evaluar los niveles de expresión de los genes ATP2A2 y ATP2A3 en líneas celulares que representan diferentes subtipos de cáncer de mama. RESULTADOS: La línea celular MDA-MB-231 expresa niveles más bajos del ARNm para el gen ATP2A3, en comparación con las células MCF-7. El uso del fitoestrógeno resveratrol induce la expresión de ATP2A3, disminuye la proliferación e induce apoptosis en ambos tipos de células. CONCLUSIONES: La expresión de SERCA puede funcionar como una herramienta para diferenciar los subtipos de cáncer de mama, los cuales tienen distintas necesidades de tratamiento.

Expresión génica de receptores ECA2 en cavidad bucal y glándulas salivales y su papel en la infección por SARS CoV2. Revisión de la literatura / Gene Expression of ECA2 Receptors in the Oral Cavity and Salivary Glands and Its Role in SARS CoV2 Infection. Literature Review

Resumen Los receptores ECA2 presentan una expresión génica importante en las células escamosas de la lengua y glándulas salivales, mecanismo que es conveniente para la inoculación de SARS CoV2 toda vez que busca hacer el complejo de ensamblaje mediante su glicoproteína o proteína espiga hacia el receptor ECA2 de la mucosa bucal. Una vez inoculado y favorecido por las proteasas es la llave que permite la entrada del virión en la célula huésped para su posterior replicación, aumento de carga viral y potencial desaminación e infección; los estomatólogos deben estar alerta de los mecanismos de infección en cavidad bucal para protección propia y de los pacientes que son atendidos por este personal de salud.

Abstract ECA2 receptors have an important gene expression in the squamous cells of the tongue and salivary glands, a mechanism that is convenient for the inoculation of SARS CoV2 since it seeks to make the assembly complex through its glycoprotein or spike protein towards the ECA2 receptor of the oral mucosa. Once inoculated and favored by proteases, it is the key that allows the entry of the virion into the host cell for its subsequent replication, increase of viral load and potential deamination and infection; dental professionals must be alert to the mechanisms of infection in the oral cavity for their own protection and that of the patients who are treated by this health personnel.

Expresión de alfa sinucleína en sangre y su relación con el estreñimiento crónico en población residente en Bogotá, con problemas de consumo de alcohol / Alpha sinuclein expression in blood and its relationship with chronic constipation in a population from Bogotá, with problems of alcohol consumption

Introducción. El consumo excesivo de alcohol resulta en neuroadaptación, neurodegeneración y expresión diferencial de numerosos genes. Objetivo. Determinar la relación entre la expresión del gen de la alfa sinucleína (SNCA) en sangre, las variantes de nucleótido único (Single Nucleotide Variant, SNV) en su región promotora y el estreñimiento crónico en personas con problemas de consumo de alcohol. Materiales y métodos. La muestra estuvo conformada por 35 controles y 27 casos, seleccionados según el puntaje obtenido con la herramienta AUDIT. En el diagnóstico del estreñimiento se aplicaron los criterios de Roma IV. La extracción de ácidos nucleicos se hizo a partir de sangre periférica y se evaluó la expresión del gen mediante qPCR, la cuantificación proteica por ELISA y la presencia de SNV en la región promotora del gen por la secuenciación de Sanger. Resultados. Se observó sobreexpresión génica relativa de ARNm del gen SNCA en el grupo de casos sin relación con el estreñimiento crónico. Se evidenció un riesgo 4,8 veces mayor de presentar estreñimiento en el grupo de casos. Se encontraron nueve variantes de nucleótido simple en un segmento de la región promotora del gen rica en secuencias reguladoras CpG, con frecuencia similar entre los grupos, y se detectó una variante en la posición -2171 que no se encuentra reportada en GenBank para variantes clínicas y cuyo genotipo A/T se relacionó con el incremento de la expresión del ARNm del SNCA. Conclusión. En personas con problemas de consumo de alcohol se evidenció la sobreexpresión del ARNm de alfa sinucleína, lo cual no se relacionó con el diagnóstico de estreñimiento crónico.

Introduction: Excessive alcohol consumption results in neuroadaptation, neurodegeneration, and differential expression of numerous genes. Objective: To determine the relationship between the expression of the alpha synuclein gene (SNCA) in blood, single nucleotide variant (SNV) in its promoter region, and chronic constipation in people with problems of alcohol consumption. Materials and methods: The sample consisted of 35 controls and 27 cases selected according to the score obtained with the AUDIT tool. For the diagnosis of constipation, the Rome IV criteria were applied. Nucleic acid extraction was performed from peripheral blood and the expression of the gene was evaluated by qPCR, protein quantification by ELISA, and the presence of SNV in the promoter region of the gene by Sanger sequencing. Results: We observed a relative gene overexpression of SNCA mRNA in the case group, which was not related to the diagnosis of chronic constipation. There was 4.8 times greater risk of presenting constipation in the group of cases. Besides, nine single nucleotide variants were found in a segment of the promoter region of the gene rich in CpG regulatory sequences with similar frequency between the groups while a variant was identified in position -2171, which is not reported in GenBank for variants and whose genotype A/T was associated with increased expression of SNCA mRNA. Conclusion: We evidenced an overexpression of alpha synuclein mRNA in people with problems of alcohol consumption that was not related to the diagnosis of chronic constipation.

Morphometric analysis and pattern of protein and gene expression of apoptosis in focal cerebral ischemia in rats and the neuroprotetive action of hypothermia and ketoprofen / Análisis morfométrico y modelo de expresión de proteína y genes de apoptosis en isquemia cerebral focal en ratas y la acción neuroprotectora de hipotermia y ketoprofeno

This study aimed to investigate the morphometric and the pattern of protein and gene expression related to the extrinsic apoptotic pathway in experimental focal cerebral ischemia and the hole of neuroprotection with hypothermia and ketoprofen. For this analysis, 120 rats were randomly divided into 3 groups (20 animals each): control - no surgery (20 animals); sham - simulation of surgery (20 animals); ischemic - focal ischemia for 1 hour, without reperfusion (80 animals) and divided into four subgroups with 20 animals each: ischemic + intraischemic hypothermia; ischemic + previous intravenous ketoprofen, and ischemic + hypothermia and ketoprofen. The infarct volume was measured using morphometric analysis of infarct areas defined by triphenyl tetrazolium chloride and the patterns of expression of the apoptosis genes (Fas, c-Flip, caspase-8 and caspase-3) and the apoptosis protein caspase-3 were evaluated by quantitative real-time PCR and immunohistochemistry, respectively. Hypo expression of genes of extrinsic pathway of apoptosis was observed: Fas receptor, c-Flip and caspase-8 in the ischemics areas. Increases in the gene and protein caspase-3 in the ischemic areas were also observed, and these increases were reduced by hypothermia and ketoprofen, also noted in the morphometric study. The caspases-3 increase suggests that this gene plays an important role in apoptosis, probably culminating in cell death and that the neuroprotective effect of hypothermia and ketoprofen is involved.

Este estudio tuvo como objetivo investigar la morfometría y el patrón de expresión de proteínas y genes relacionados con la vía apoptótica extrínseca en la isquemia cerebral focal experimental y el agujero de neuroprotección con hipotermia y ketoprofeno. Se dividieron aleatoriamente 120 ratas en 3 grupos (20 animales cada uno): control - sin cirugía (20 animales); simulación - simulación de cirugía (20 animales); isquemia isquemia focal durante 1 hora, sin reperfusión (80 animales) y dividida en cuatro subgrupos con 20 animales cada uno: isquemia + hipotermia intraisquémica; isquemia + ketoprofeno intravenoso previo, e isquemia + hipotermia y ketoprofeno. El volumen del infarto se midió utilizando un análisis morfométrico de áreas de infarto definidas por cloruro de trifenil tetrazolio y los patrones de expresión de los genes de apoptosis (Fas, c-Flip, caspase-8 y caspase-3) y la proteína de apoptosis caspase-3 fueron evaluados por PCR cuantitativa en tiempo real e inmunohistoquímica, respectivamente. Se observó hipoexpresión de genes de la vía extrínseca de la apoptosis: receptor Fas, c-Flip y caspasa-8 en las áreas isquémicas. También se observaron aumentos en el gen y la proteína caspasa-3 en las áreas isquémicas y estos aumentos se redujeron por hipotermia y ketoprofeno, también observado por estudio morfométrico. El aumento de caspasas-3 sugiere que este gen tiene un papel importante en la apoptosis, y probable causa de muerte celular, involucrando el efecto neuroprotector de la hipotermia y el ketoprofeno.

Folic acid-deficient diet during gestation and post-weaning alters Pomc gene and protein expression in rat offspring.

INTRODUCTION: Background: folic acid participates in one-carbon metabolism, which supplies methyl groups to numerous reactions in the body. Impaired delivery of these methyl groups affects gene expression. We hypothesize that offspring exposed to less folic acid will express higher levels of Pomc (proopiomelanocortin) gene mRNA. Aim: to investigate the Pomc gene and protein expression pattern in the female offspring of female rats receiving a folic acid-deficient diet during gestation, lactation, and post-weaning. Methods: the study involved female rat offspring (n = 10) born from mothers subjected to a control (2.0 mg of folic acid/kg of food) or folic acid-deficient (0.5 mg of folic acid/kg of food) diet, and fed the same diet during post-weaning. Samples were collected from the arcuate nucleus of the hypothalamus of the female offspring for real-time PCR and Western blotting analyses. Results: the female offspring in the folic acid-deficient diet group had significantly higher Pomc gene and protein expression than the female offspring in the control diet group (p = 0.03, p = 0.01, respectively). Conclusion: a folic acid-deficient diet during gestation, lactation, and post-weaning increases Pomc gene and protein expression, but does not modify food intake or body weight of female rat offspring.

INTRODUCCIÓN: Antecedentes: el ácido fólico participa en el metabolismo de un solo carbono, que suministra grupos metilo a numerosas reacciones del cuerpo. La aportación alterada de estos grupos metilo afecta a la expresión génica. Nuestra hipótesis es que la descendencia expuesta a menos ácido fólico expresará niveles más altos de ARNm del gen Pomc (proopiomelanocortina). Objetivo: investigar el patrón de expresión del gen Pomc y de sus proteínas en crías de ratas hembras que recibieron una dieta deficiente en ácido fólico durante la gestación, la lactancia y el destete. Métodos: el estudio incluyó crías hembras (n = 10) nacidas de madres sometidas a una dieta control (2,0 mg de ácido fólico/kg de alimento) o deficiente en ácido fólico (0,5 mg de ácido fólico/kg de alimento) durante la gestación y la lactancia, y alimentadas con la misma dieta durante el destete. Se recolectaron muestras del núcleo arqueado del hipotálamo de las hembras para el análisis de la expresión génica (PCR en tiempo real) y de proteínas (inmunomanchado Western). Resultados: las hembras pertenecientes al grupo de dieta deficiente en ácido fólico tuvieron una expresión del gen Pomc y sus proteínas significativamente mayor que la de las hembras pertenecientes al grupo con dieta de control (p = 0,03, p = 0,01, respectivamente). Conclusión: la dieta deficiente en ácido fólico durante la gestación, la lactancia y el destete modifica la expresión del gen Pomc y sus proteínas pero no modifica la ingesta de alimentos ni el peso corporal de las ratas hembra.